Επίδραση της σαπωνίνης και των κλασμάτων της στό εμβόλιο αφθώδους πυρετού

Abstract

Έγινε προσπάθεια διαχωρισμού του διευκολυντικοΰ παράγοντα της σαπωνίνης άπό τον αιμολυτικό καί ερεθιστικό παράγοντα με τήν μέθοδο της χρωματογραφίας. Σαπωνίνη διαλύματος 40% χρωματογραφήθηκε πρώτα σε Sephadex G-25 καί το πρώτο κλάσμα άπό το διάλυμα αυτό επαναχρωματογραφήθηκε σε Sephadex G-200. Άπό τις τρεις καμπύλες πού πήραμε άπό το Sephadex G-200, εξετάσαμε μόνον τις δύο πρώτες. Συγκρίθηκαν αυτές μέ το διάλυμα σαπωνίνης 40% στην αίμόλυση, νέκρωση καί στην ενισχυτική των ιδιότητα στο εμβόλιο αφθώδους πυρετού (τύπος Α22). Τό διάλυμα σαπωνίνης 40% αίμολύει αίμοσφαίρια προβάτου (3% εναιώρημα αιμοσφαιρίων πλυμένα καί αραιωμένα σε ρυθμιστικό διάλυμα βερονάλης) στην αραίωση μέ 0,075 mg τουλάχιστον σαπωνίνη. Τό κλάσμα Α του G-25 αίμολύει στην αραίωση μέ 0,156 mg καί τό κλάσμα Β του G-25 στην αραίωση μέ 0,312 mg σαπωνίνης. Τά κλάσματα της καμπύλης II του G-200 αίμολύουν μέ 0,156 mg ένώ της καμπύλης Ι δέν αίμολύουν ούτε μέ 10-πλάσια ποσότητα. Ή αίμόλυση δοκιμάσθηκε συγκριτικά σέ 3% εναιώρημα ερυθρών αιμοσφαιρίων προβάτου καί σέ αίματοΰχο άγαρ (1% άγαρ μέ 3% αίμοσφαίρια προβάτου). Ό αίμολυτικός τίτλος της σαπωνίνης στο αίματοΰχο άγαρ είναι 3 αραιώσεις ψηλότερα (μέ λογάριθμο του 2) άπό εκείνον σέ εναιώρημα ερυθρών. Γίνεται σκέψη αξιοποιήσεως της μεθόδου στην ανίχνευση μικροποσοτήτων σαπωνίνης. Ό βαθμός του ερεθισμού καί της νέκρωσης διαφέρει μεταξύ της αυτούσιας σαπωνίνης καί τών κλασμάτων αυτής. Τό διάλυμα σαπωνίνης 40% προξενεί 50% νέκρωση μέ 0,8 mg, τό κλάσμα Α του G-25 μέ 3,4 mg τό Β του G- 25 μέ 1,13 καί τό κλάσμα II τοΰ G-200 μέ 3mg ένώ τό κλάσμα Ι τού G200 δέν προκαλεί νέκρωση ούτε σέ 10-πλάσιο όγκο. Ό τίτλος όροεξουδετερωτικών αντισωμάτων ίνδοχοιριδίων μετά τον εμβολιασμό καί τήν μόλυνση μέ τον ίδιο τύπο ίου 'Αφθώδης Πυρετού (τύπος Α22), παρουσιάζει διακυμάνσεις καί δέν έχει σχέση μέ τήν παρεχομένη προστασία. Ή Π.Δ.Ι.50 τοΰ εμβολίου ώς προς τον ιό τοΰ 'Αφθώδους Πυρετού τύπου Α22, χωρίς προσθήκη σαπωνίνης είναι 0,125 κυβ. εκατ. εμβολίου, μέ προσθήκη σαπωνίνης διαλύματος 40% (μέ 0,312 mg σαπωνίνης κατά δόση εμβολίου) είναι 0,062 καί σέ χαμηλότερη αραίωση (μέ 0,625mg σαπωνίνης κατά δόση εμβολίου) είναι 0,062 κυβ. εκατ. Εμβολίου Ή προσθήκη των κλασμάτων Ι και II του Shephadex G-200 δεν επηρεάζει την άνοσοποιό δύναμη του εμβολίου.