Ανάπτυξη DNA εμβολίου για την ανοιξιάτικη ιογενή καμία του Κυπρίνου


Δημοσιευμένα: Nov 24, 2017
Λέξεις-κλειδιά:
Ανοιξιάτικη ιογενής ιαιμία του κυπρίνου DNA εμβόλια
Th. S KANELLOS (Θ.Σ. ΚΑΝΕΛΛΟΣ)
E. M. XYLOURI (Ε.Μ. ΞΥΛΟΥΡΗ)
P. H. RUSSEL
Περίληψη

Η ανοσοποίηση ενός οργανισμού με χο πλασμιδιακό DNA αποτελεί έναν πολλά υποσχόμενο εναλλακτικό τρόπογια να προκληθεί ανοσία έναντι λοιμωδών παραγόντων. Σκοπός της παρούσας έρευνας ήταν να μελετηθεί ένα DNA εμβόλιο έναντι της Ανοιξιάτικης ιογενους ιαιμίας του κυπρίνου (Spring Viraemia ofCarp Virus, SVCV), οφειλόμενης σε ραβδοιό, μελετώντας τη γλυκοπρωτείνη G του ίου. Το γονίδιο G ενσωματώθηκε στο πλασμιδιακό DNA και κλωνοποιήθηκε. Η έκφραση του γονιδίου πραγματοποιήθηκε με τη βοήθεια των παρακάτω ενισχυτών: 1) του κυτταρομεγαλοϊου, 2) του simian virus 40, και 3) της χοίρειας βαριάς αλυσίδας μυοσίνης II Α. Το κλωνοποιημένο γονίδιο G ανασυνδυάστηκε είτε με το γονίδιο της E coli, LacZ (ως ανοσοενισχυτικό των Τ λεμφοκυττάρων), είτε με την οδηγό αλληλουχία Ig kchainγια την παραγωγή της εκκριτικής μορφής της πρωτείνης G. Μύες BALB/c ανοσοποιήθηκαν με τα προαναφερθέντα ανασυνδυασμένα πλασμίδια και προκλήθηκε έντονη κυτταρική ανοσολογική απάντηση (T-cellproliferativeresponses) στον SVCV, εν απουσία ανιχνεύσιμων αντισωμάτων για τον ιό. Η ομάδα των ποντικών που έδωσε εντονότερη ανοσολογική απάντηση ήταν εκείνη που είχελάβει το γονίδιο LacZ και έτσι αυτό το γονίδιο ελέγχθηκε αργότερα με την παράλληλη έγχυση ενός πλασμιδίου που εξέφραζε τηνκυτταροκίνη GranulocyteMacrophaseColonyStimulatingFactor(GMCSF). Έτσι, η παράλληλη χορήγηση του πλασμιδίου έκφρασης GMCSF είχε ως αποτέλεσμα την υψηλή ανοσολογική απάντηση έναντι του ίου της Ανοιξιάτικης ιογενους ιαιμίας του κυπρίνου,από τα λεμφοκύτταρα της σπλήνας του ποντικού, με αύξησηστην παραγωγή και των δυο πρωτεϊνών που είχαν υποστεί ανασυνδυασμό (fusion). Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν τη λειτουργικότητα των DNA εμβολίων που εξετάστηκαν και την πιθανότητατα εμβόλια να αναπτύσσουν ανοσολογική προστασία στους ιχθυες.

Λεπτομέρειες άρθρου
  • Ενότητα
  • Research Articles
Λήψεις
Τα δεδομένα λήψης δεν είναι ακόμη διαθέσιμα.
Αναφορές
Anderson ED, Mourich DV, Fahrenkrug SC, La Patra S, Shepherd J, Leong JA. Genetic immunization of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) against infectious hematopoietic necrosis virus. Molecular Marine Biology and Biotechnology 1996, 5: 114-122.
Anderson ED, Mourich DV, Leong JAC. Gene expression of rainbow trout (Oncorynchus mykiss) following intramuscular injection of DNA. Molecular Marine Biology and Biotechnology 1996,5:105-113.
Andre S, Seed B, Eberle J, Scharaut W, Bultmann A, Haas J. Increased immune response elicited by DNA vaccination with a synthetic gpl20 sequence with optimized codon usage. Journal of Virology 1998, 72:1497-1503.
Barry MA, Johnston SA. Biological feature of genetic immunization. Vaccine 1997,15:788-791.
Chang KC Critical regulatory domains in intron 2 of a porcine sarcomeric myosin heavy chain gene. J Muscle Res Cell Motil. 2000; 21(5):451-61.
Coll JM. The glycoprotein G of rhabdoviruses. Archives of Virology 1995,140:827851.
Czerkinsky C, Moldoveanu Z, Mestecky J, Nilsson LA, Ouchterlony O, Tarkowski, A. A novel two color ELISPOT assay. 1. Simultaneous detection of distinct types of antibody-secreting cells. Journal of Immunological Methods 1988,115:31-37.
Davis HL, Brazlot Millan CL, Watkins SC. Immune mediated destruction of transfected muscle fibers after direct gene transfer with antigen expressing plasmid DNA. Gene Therapy 1997, 4:181-188.
Dixon P. Immunization with viral antigens: viral diseases of carp and catfish. Development of Biological Standardization 1997, 90:221-232.
Dixon PF, Hattenberger-Baudouy AM, Way K. Detection of carp antibodies to spring viraemia of carp virus by a competitive immunoassay. Diseases of Aquatic Organisms 1994,19:181-186.
Donnelly JJ, Ulmer JB, Shiver WS, Liu MA. DNA Vaccines. Annual Reviews of Immunology 1997, 15: 617-618.
Fijan N. Vaccination against Spring Viraemia of Carp Virus. Fish Vaccination. Academic press limited 1988, pp. 204-215.
Fynan EF, Robinson HL, Webster RG. Use of DNA encoding influenza hemagglutinin as an avian influenza vaccine. DNA and Cell Biology 1993,12:785-789.
Gerloni M, Lo D, Ballou WR, and Zanetti M. Immunological memory after somatic transgene affected by priming with GMCSF and does not require bone marrow-derived dendritic cells. European Journal of Immunology 1998, 28: 1832-1838.
Grifantini R, Fineo Ο, Bartolini E, Draghi M, Del Giudice G, Kocken C, Thomas A, Abrigiani S, Grandi G. Multi-plasmid DNA vaccination avoids antigenic competition and enhances immunogenicity of a poorly immunogenic plasmid. European Journal of Immunology 1998, 28:1225-1232.
Hansen E, Fernandes K, Goldspink G, Butterworth P, Umeda PK, Chang KC. Strong expression of foreign genes following direct injection into fish muscle. FEBS Letters 1991, 290: 73-76.
Kanellos T., Sylvester ID., D'Mello F, Howard CR, Mackie A, Dixon P, Chang K, Ramstad A Midtlyng P, Russell P. DNA vaccination can protect Cyprinus Carpio against spring viraemia of carp virus. Vaccine 2006, 24: 4927-4933.
Leong JC, Anderson E, Bootland LM, Chiou PW, Johnson M, Kim C, Mourich D, and Trobridge G. Fish vaccines antigen produced or delivered by recombinant DNA technologies. Development of Biological Standardization 1997, 90: 267-278.
Lorenzen N, Lorenzen K, Einer-Jensen K, Heppel J, Wu T, Davis H. Protective immunity to VHS in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum) following DNA vaccination. Fish and Shellfish Immunology 1998, 8: 261-270.
Martins PL, Lau LL, Asano MS, Ahmad R. DNA vaccination against persistent viral infection. Journal of Virology 1995, 69:2574-2582.
Mitchison NA. The carrier effect in the secondary response to hapten-protein conjugates. European Journal of Immunology 1971, 1: 10-17.
Oliveira CD, Feenstra A, Vos H, Osterhaus AD, Shiels BR, Cornelissen AW, Jongejan F. Induction of protective immunity to Theileria annulata using two major surface antigen presented
by different delivery systems. Vaccine 1997, 16:1796-1804.
Partidos CD, Stewart MW. Prediction and identification of a T-cell epitope in the fusion protein of measles virus immunodominant in mice and humans. Journal of General Virology 1990, 71: 2099-2105.
Roberts AM. Spring viraemia of carp virus. The Veterinary Record 1994,11: 694.
Robertson J S. Safety considerations for nucleic acid vaccines. Vaccine 1994,12: 1526-1528.
Robinson HL. Nucleic acid vaccines: an overview. Vaccine 1997,15:785-787.
Russell PH, Kanellos T, Sylvester ID, Chang KC, Howard CR. Nucleic acid immunisation with a reporter gene results in antibody production in goldfish (Carassius auratus L.). Fish and Shellfish Immunology 1998, 8:121-128.
Russell PH. The non-specific stimulation of avian peripheral blood lymphocytes from uninfected chickens by paramyxoviruses and influenza viruses. Veterinary Microbiology 1988, 16: 181-188.
Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T. Molecular cloning. A laboratory Manual. 2nd edition. Cold Spring Harbor Press 1989.
Tighe H, Corr M, Roman M, Raz E. Gene vaccination: plasmid DNA is more than just a blueprint. Immunology Today 1998,19:89-97.
Wells DJ. Gene transfer by intramuscular injection of plasmid DNA. Molecular and Cell Biology of human Gene Therapeutics, ed. G Dickson, pp 83-103. Chapman and Hall, London 1995.
Wells KE, Maule J, Kingston R, Foster K, McMahon J, Damien E, Poole A, Wells DJ. Immune responses, not promoter inactivation, are responsible for decreased long term expression following plasmid gene transfer into skeletal muscle. FEBS Letters 1997, 407: 164-168.
Xiang ZQ, Spitalnik SL, Cheng J, Erikson J, Wojczyk B, and Erti HCJ. Immune responses to nucleic acid vaccines to rabies virus. Virology 1995, 209: 569-579.