Εργαστηριακή διερεύνηση της ελλιπώς μελετημένης στην Ελλάδα λεπτοσπείρωσης των μικρών μηρυκαστικών: προβλήματα και συστάσεις


Δημοσιευμένα: Ιαν 31, 2018
Λέξεις-κλειδιά:
ιστολογία Λεπτοσπείρωση ΜΑΤ μικρά μηρυκαστικά PCR
A. G. BISIAS (Α.Γ. ΜΠΙΣΙΑΣ)
C. S. KRITAS (Κ.Σ. ΚΡΗΤΑΣ)
C. H. BILLINIS (Χ. ΜΠΙΛΛΙΝΗΣ)
R. A. BURRIEL
Περίληψη

Η λεπτοσπείρωση στην Ελλάδα είναι μια παραμελημένη μόλυνση. Τα μικρά μηρυκαστικά, ιδιαίτερα τα πρόβατα, αν και θεωρούνται τυχαίοι ξενιστές του γένους Leptospira, θα μπορούσαν να γίνουν πηγές διασποράς παθογόνων ορότυπων. Ως εκ τούτου, σκοπός μας ήταν η διερεύνηση της λεπτοσπείρωσης μικρών μηρυκαστικών σε περιοχές της νότιας Ελλάδας, που προηγούμενα ευρήματα έδειχναν ότι η λεπτοσπείρωση αποτελούσε πιθανή σημαντική λοίμωξη των ζώων και του ανθρώπου. Για το σκοπό αυτό οροί αίματος και νεφροί ενήλικων ζώων συλλέχτηκαν κατά τη σφαγή από θηλυκά ζώα. Εκατόν δέκα δείγματα (ορών και ιστών) διερευνήθηκαν με ένα εμπορικό kit ταχείας οροδιερεύνησης, την μέθοδο της μικροσυγκόλισης (ΜΑΤ), ιστολογική εξέταση και PCR. Από τα δείγματα ορών 55 (50%) ήταν ύποπτα λεπτοσπείρωσης στο kit and 28 (25.45%) θετικά στη μέθοδο MAT. Από τα δείγματα ιστών 38 (34.5%) ήταν PCR θετικά and 30 (27.2%) είχαν διάφορους βαθμούς μικροσκοπικών αλλοιώσεων. Οι ορότυποι που αναγνωρίστηκαν με τη μέθοδο MAT ήταν Tarassovi (10 ζώα), Autumnalis (8 ζώα), Zanoni (4 ζώα), HebdomadisandJavanica (2 στον καθένα), BratislavaandHardjioprajitno (1 στον καθένα). Συμπεραίνεται ότι τα μικρά μηρυκαστικά και συγκεκριμένα τα πρόβατα (98 από τα 110 ζώα) είναι πηγές διασποράς παθογόνων ορότυπων Leptospira spp. Σε περιοχές που οι κλιματολογικές συνθήκες ευνοούν την επιβίωση του παθογόνου.

Λεπτομέρειες άρθρου
  • Ενότητα
  • Research Articles
Λήψεις
Τα δεδομένα λήψης δεν είναι ακόμη διαθέσιμα.
Αναφορές
Ahmed A, Klaasen HLBM, van der Veen M, van der Linden H, Goris MGA, Hartskeerl RA (2012) Evaluation of Real-Time PCR and Culturing for the Detection of Leptospires in Canine Samples. Advan Microbiol 2:162-170
Barbante P, Shimabukuro FH, Langoni H, Richini-Pereira VB, Lucheis SB (2014) Leptospira spp. infection in sheep herds in southeast Brazil. J Venom Anim Toxins Incl Trop Dis 20(20):1-7, doi: 10.1186/1678-9199-20-20
Biosecurity Australia. Scientific review of leptospirosis and implications for quarantine policy, Department of Agriculture, Fisheries and Forestry – Australia http://www.daff.gov.au/__data/assets/pdf_file/0008/23201/2001-23.pdf, 15-7—2014
Bisias G, Burriel AR, Boutsini S, Kritas S, Leontidis L (2009) A serological investigation of some abortion causes among small ruminant flocks in Greece. Int J Vet Med 9(2): 1-7
Blenden DC, Goldberg HS (1965) Silver impregnation stain for Leptospira and flagella. J. Bacteriol 89(3):899-900.
Bomfim MRQ, Koury MC (2006) Evaluation of LSSP-PCR for identification of Leptospira spp. in urine samples of cattle with clinical suspicion of leptospirosis. Vet Microb 118:278-288
Burriel AR, Magana-Vougiouka O, Butsini S, Nomikou K, Patakakis M (2002) A serologic investigation of some causes of reproductive failure among small ruminants in Greece. OJVR 1:57-63, http://users.comcen.com.au/~journals/ojb/jvet196a.htm, 15-7-2014
Burriel AR, Dalley C, Woodward MJ (2003) Prevalence of Leptospira species among farmed and domestic animals in Greece. Vet Rec 153:146-148
Cerqueria GM and Picardeau M (2009) A century of Leptospira strain typing. Inf Gen Evol 9:760–768, doi: 10.1016/j. meegid.2009.06.009
Cerqueira GM, McBride AJA, Queiroz A, Pinto LS, Silva ÉF, Hartskeerl RA, Reis MG, Ko AI, Dellagostin OA (2010) Monitoring Leptospira Strain Collections: The Need for Quality Control. Am J Trop Med Hyg 82(1):83–87 doi:10.4269/ajtmh.2010.09-0558
Croda J, Ramos JRG, Matsunaga J, Queiroz A, Homma A, Riley LW, Haake DA, Reis MG, Ko AI (2007) Leptospira immunoglobuling like proteins as a serodiagnostic marker for acute leptospirosis. J Clin Microbiol 45(5): 1528–1534, doi: 10.1128/JCM.02344-06
Cullen PA, Xu X, Matsunaga J, Sanchez Y, Ko AI, Haake DA, Adlers B (2005) Surfaceome of Leptospira spp. Infect Immun 73(8):4853-4863, doi:10.1128/IAI.73.8.4853-4863.2005
d’Andon MF, Quellard N, Fermandez B, Ratet G, Lacroix – Lamande S, Vandewalle A, Boneca IG (2014) Leptospira Interogans induces fibrosis in the mouse kidney through Inos-dependent, TLR – and NLR-independent signaling pathways. PLoS Negl Trop Dis
(1):e2664, doi:10.1371/jpurnal.pntd.ooo2664
Doungchawee G, Kositanont U, Niwetpathomwat A, Inwisai T, Sagarasaeranee P, Haake DA (2008) Early Diagnosis of Leptosirosis by immunoglobulin M immunoblot testing. Clin Vaccine Immunol 15(3):492-498, doi:10.1128/CVI.00152-07
Faber NA, Crawfors M, LeFebvre RB, Buyukmihcl NC, Madigan JE, Willits NH (2000) Detection of Leptospira spp in the aqueous humor of horses with naturally acquired recurrent uveitis. J Clin Microbiol 38(7):2731-2733
Fischer AH, Jacobson KA, Rose J, Zeller R (2006) Hematoxylin and Eosin staining of tissue and cell sections. Preparation of Cells and Tissue for Fluorescence Microscopy In: (eds: Spector DL, Goldman RD) Basic Methods in Microscopy. New York, Cold Spring Harbor Laboratory Press pp. 63-68
Gravenkamp C, Van de Kamp H, Franzen M, Hartskeerl, RA, de Meza-BrewsterJ, Korver H, Terpstra WJ (1993) Detection of seven species of pathogenic leptospires by PCR using two sets of primers. J Gen Microbiol 139:1691-1700
Hamir AN, Hanlon CA, Niezgoda M, Rupprecht CE (2001) The prevalence of interstitial nephratis and leptospirosis in 283 raccons (Procyon lotor) from 5 different sites in the United States of America. Can Vet J 42(11):869-871
Hartskeerl RA, Collares-Pereira M, Ellis WA (2011) Emergence, control and re-emerging leptospirosis: dynamics of infection in the changing world. Cl Microbiol Inf 17:494-501, doi: 10.1111/j.1469-0691.2011.03474.x
Jansen A, Schoneberg I, Frank Ch, Alpers K, Schneider T, Stark K (2005) Leptospirosis in Germany, 1962 – 2003. Emerg Infect Dis 1048–1054
International Leptospirosis Society, WHO http://www.leptonet.net/assets/images/LeptoGuidelines_Print_version_19May03.pdf 14-7-2014
Kawaguchi L, Sengkeopraseuth B, Tsuyuoka R, Koizumi N, Akashi H, Vongphrachanh P, Watanabe H, Aoyama A (2008) Seroprevalence of Leptospirosis and risk factor analysis in flood-prone rular areas in Lao PDR. Am J Trop Med Hyg 78(6): 957-961
Kwok S, Higuchi R (1989) Avoiding false positives with PCR. Nature 339(6221):237–238, doi:10.1038/339237a0
Levett PN (2004) Leptospirosis: A forgotten zoonosis? Clin Applied Immunol Rev 4:435-438, doi: 10.1016/j.cair.2004.08.001
Lilenbaun W, Varges R, Branadao FZ, Cortez A, de Souza SO, Branadao PE, Richtzenbhain LJ, Vasconcellos SA (2008) Detection of Leptospira spp in semen and vaginal fluids of goats and sheep by polymerase chain reaction. Theriogenology 69:837-832, doi:10.1016/j.theriogenology.2007.10.027
Lilenbaum W, Varges R, Ristow P, Cortez A, Souza SO, Rictzenhain LJ, Vasconcellow SA (2009) Identification of Leptospira spp. carriers among seroactive goats and sheep by polymerase chain reaction. Research in Veterinary Science 87:16-19, doi: 10.1016/j.rvsc.2008.12.014
Monahan AM, Callanan JJ, Nally JE (2009) Host-pathogen interactions in the kidney during chronic leptospirosis. Vet Pathol 46:792-9,doi:10.1354/vp.08-VP-0265-N-REV
OIE Terrestrial Manual (2008) Leptospirosis, 251-263. http://web.oie.int/esp/normes/mmanual/pdf_es_2008/2.01.09.%20Leptospirosis.
pdf , 10-5-2014
Saglam YS, Yener Z, Temur A, Yalcin E (2008) Immunohistochemical detection of leptospiral antigens in case of naturally occurring abortions in Sheep. Small Rum Res 74:119-112, doi: http://dx.doi.org/10.1016/j.smallrumres.2007.04.006
Sakolvaree Y, Maneewatch S, Jiemsup S, Klaysing B, Tongtawe P, Srimanote P, Saengjaruk P, Banyen S, Tapchaisri P, Chonsa-nguan M, Chaicumpa W (2007) Proteome and immunome of pathogenic Leptospira spp. revealed by 2DE and 2DE-immunoblotting with immune serum. Asian Pac J Allergy Immunol 25(1):53-63.
Sambasiva RR, Naveen G, Bhalla P, Agarwal SK (2003) Leptospirosis in India and the rest of the World. Braz J Infect Dis 7(3):178-183,doi.org/10.1590/S1413-86702003000300003
Soto FRM, de Azevedo SS, de Morais ZM, Pinheiro SR, Delbem ÁClB, Moreno AM, Paixão R, Vuaden ER, Vasconcellos SA (2006) Detection of leptospires in clinically healthy piglets born from sows experimentally infected with Leptospira interrogans serovar Canicola. Braz J Microbiol 37(4):582-586, doi.org/10.1590/S1517-83822006000400034
Szeredi L, Haake DA (2006) Immunochemical identification and pathologic findings in natural cases of equine abortion caused by leptospiral infection. Vet Pathol 43:755-761
Wang Z, Jin L, Wegrzyn A (2007) Leptospirosis Vaccines. Microbial Cell Factories 6:39, doi:10.1186/1475-2859-6-39, http://www.microbialcellfactories.com/content/6/1/39, 15-7-2014
Zhang C, Wang H, Yan J (2012) Leptospirosis prevalence in Chinese populations in the last two decades. Microbes Infect 14:317-323, doi:10.1016/j.micinf.2011.11.007