Τροποποιημένη μέθοδος ποιοτικής ανίχνευσης θυρεοστατικών ουσιών στο κρέας και τα ούρα των παραγωγικών ζώων με την εφαρμογή της Planar Thin Layer Chromatography διπλής και 4x4 οριζόντιας ανάπτυξης


Δημοσιευμένα: Jan 31, 2018
Λέξεις-κλειδιά:
θυρεοστατικά αντιορμόνες ούρα κρέας HPTLC Planar Chromatography
A. E. TYRPENOU (Α.Ε.ΤΥΡΠΕΝΟΥ)
E. H. GOUTA (E.H. ΓΟΥΤΑ)
Περίληψη

Οι ουσίες με θυρεοστατική δράση, γνωστές επίσης ως αντι-ορμονες [Anti-Hormones-AHs], εκχυλίζονται με τη βοήθεια μεθανόλης παρουσία εσωτερικού προτύπου. Η διέλευση του μεθανολικού εκχυλίσματος δια μέσου μιας υδραργυρικής προσροφητικής στήλης επιτρέπει την εκλεκτική και επαναλήψιμη εκχύλιση τους με το σχηματισμό ενός ειδικού συμπλόκου των AHs με τα ιόντα Hg. Μετά την έκλουση των AHs με όξινο διάλυμα χλωριούχου νατρίου και τη ρύθμιση του pH στο 8,0 ακολουθεί παραγωγοποίηση με NBD-C1, ένα αντιδραστήριο που αντιδρά μόνο με τις θειόλες και τις αμίνες. Μετά το πέρας της αντίδρασης, τα σύμπλοκα AH-NBD που σχηματίζονται, εκχυλίζονται με ΤΒΜΕ σε όξινο περιβάλλον και υστέρα από συμπύκνωση μέχρι ξηρού και αναγέννηση στον κατάλληλο όγκο αναλύονται χρωματογραφικά με τη χρησιμοποίηση εξοπλισμού υψηλής τεχνολογίας. Με την επίδραση υδατικού διαλύματος κυστεϊνης τα σύμπλοκα AH-NBD, τα οποία δεν φθορίζουν στα 366 nm μετατρέπονται σε σΰμπλοκα κυστείνης-NBD, τα οποία φθορίζουν ισχυρά. Η μέθοδος που τυποποιήθηκε, βασίστηκε στη μέθοδο των Verbeke R, de Brabander HF (1984) με δικές μας τροποποιήσεις που αφορούν τη διαδικασία προετοιμασίας της μικροστήλης, την αύξηση του όγκου έκλουσης, την εφαρμογή της οριζόντιας ανάπτυξης με ταυτόχρονη μείωση του όγκου των εκλουστικών, τη μείωση του μετώπου στα 6 cm και την αντικατάσταση του ρυθμιστικού διαλύματος Brintton-Robinson. Το όριο ανίχνευσης της μεθόδου με απευθείας παρατήρηση στην πλάκα στα 366 nm, είναι μικρότερο του lng, ενώ το κατώτερο όριο ανίχνευσης στο δείγμα 25 μg/kg.

Λεπτομέρειες άρθρου
  • Ενότητα
  • Research Articles
Λήψεις
Τα δεδομένα λήψης δεν είναι ακόμη διαθέσιμα.
Αναφορές
Heitzman RJ. Veterinary drug residues. Residues in food producing animals and their products: Reference materials and methods. BCR programme, Directorate-General for Science, Research and Development. Final Report-Contract No 5464/l/5/272/91/04-BCR-UK(10). Commission of the European Communities, EUR 14126 EN, 1992
ΟΔΗΓΙΕΣ 81/602/EOK & 85/358/EOK. Περί απαγορεύσεως ορισμένων ουσιών με ορμονική ή θυρεοστατική δράση. Επίσημη Εφημερίδα των Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων, L 222/32 & L191/46
de Brabander HF, Verbeke R. Detection of antithyroid residues in meat and some organs of slaughtered animals. Journal of Chromatography 1975,108:141-151
Verbeke R, de Drabander HF. Method of analysis for detecting anti-thyroid substances in fresh muscle tissue using a selective mercurated column. Commission of the European Communities, Directorate-General for Agriculture, Document n. 3186/VI/84-EN, Brussels, 1984:1-8
Moretti G, Betto Ρ, Cammarata Ρ, Fracassi F, Giambenedetti M, Borghese Α. 1993. Determination of thyreostatic residues in cattle plasma by high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection. Journal of Chromatography 1993, 616:291-296
Hooijerink H, de Ruig WG. Determination of thyreostatics in meat by reversed-phase liquid chromatography with ultraviolet and electrochemical detection. Journal of Chromatography 1987, 394:403-407
Krivankova L, Krasensky S, Bocek P. Application of capillary zone electrophoresis for analysis of thyreostatics. Electrophoresis 1996,17:1959-1063
Kennedy DG, Blanchrlower WJ, Hughes PJ, McCoy MA, Cannavan A. Determination of Thyreostats in Urine using High Performance Liquid Chromatography-Atmospheric Pressure Chemical Ionization Mass-Spectrometry [HPLCAPCI-MS]. In: Proceedings of the EU CRL-NRL Workshop "Thyreostats in farm animals. Regulatory residue analysis within the European Union", organised by RIVM/ARO, 389002 055, Bilthoven, The Netherlands, 1998:46-53
Schilt R, Weseman JM, Hooijerink H, Korbee HJ, Traag WA, van Steenbergen MJ, Haasnoot W. Screening and confirmation of thyreostatics in urine by gas chromatography with nitrogenphosphorus detection and gas chromatography-mass spectrometry after sample cleanup with a mercurated affinity column. Journal of Chromatography 1989,489:127-137
le Bizec B, Monteau F, Maume D, Montrade MP, Gade C, Andre F. Detection and identification of thyreostats in thyroid gland by gas chromatography-mass spectrometry. Analytica Chimica Acta 1997,340:201-208
Spaan A, de Brabander HF. Determination of thyreostatic drugsby HPTLC-GC-MS. In: Proceedings of the EU CRLNRL Workshop "Thyreostats in farm animals. Regulatory residue analysis within the European Union", organised by RIVM/ARO, 389002 055 CRL, Bilthoven, The Netherlands, 1998:77-85
CAMAG. Planar Chromatography 2000. Modern Thin-Layer Chromatography. Catalogue 2000. Camag Scientific Inc., Switzerland
Tirpenou AE. Thyreostats (anti-hormones) in Greece-Group Alb with HPTLC ID, 2D & 4x4D. In: Proceedings of the EU CRL-NRL Workshop "Thyreostats in farm animals. Regulatory residue analysis within the European Union", organised by RIVM/ARO, 389002 055, Bilthoven, The Netherlands, 1998:53-57
Τα περισσότερο διαβασμένα άρθρα του ίδιου συγγραφέα(s)