Βελτίωση της μακροβιότητας του κατεψυγμένου σπέρματος του επιβήτορα


Δημοσιευμένα: Νοε 29, 2017
Λέξεις-κλειδιά:
Επιβήτορας σπέρμα αντιοξειδωτικά καφεΐνη
TAA KCHALIFA
M. M. WAHEED
A. G. LYMBEROPOULOS (Α.Γ. ΛΥΜΠΕΡΟΠΟΥΛΟΣ)
Περίληψη

Η οξειδωτική καταπόνηση των σπερματοζωαρίων κατά τη διάρκεια της συντήρησης του σπέρματος σε χαμηλές θερμοκρασίες έχει αποδειχθεί ότι είναι υπεύθυνη, σε ένα ποσοστό, για τη μείωση της κινητικότητας και της γονιμοποιητικής τους ικανότητας. Η παρούσα εργασία πραγματοποιήθηκε με σκοπό την εκτίμηση της in-vitro επίδρασης των αντιοξειδωτικών, της καφείνης ή του συνδυασμού τους στη μακροβιότητα του κατεψυγμένου σπέρματος του επιβήτορα. Ίσα μέρη κλάσματος εκσπερματίσματος απαλλαγμένου από τη ζελατινώδη φάση (η=12), τα οποία συλλέχθηκαν από 5 ίππους Αραβικής φυλής (9-18 ετών), μη γνωστής αντοχής των σπερματοζωαρίων στην κατάψυξη, αναμείχθηκαν σε αναλογία 1:1 με αραιωτικό Tris-κρόκου αυγού. Έγινε φυγοκέντρηση σε 500 χ g για 5 min, απομακρύνθηκε το υπερκείμενο υγρό και στο ίζημα των σπερματοζωαρίων γινόταν προσθήκη σε 2 φάσεις αραιωτικού, το οποίο περιείχε ή δεν περιείχε αντιοξειδωτικά (0.50 mg/ml πυρουβικό νάτριο, 1 mg/ml θειοθειϊκό νάτριο, 5 mg/ml αλβουμίνη βοείου ορού, 0.15 mg/ml χλωριούχο ψευδάργυρο και 0.50mg/ml 3-υδροξυ-4-μεθοξυ-κυναμικό οξυ).Στη συνέχεια, το αραιωμένο σπέρμα καταψύχθηκε με τη μορφή συμπυκνωμένων σφαιριδίων των 0.25 ml. Πριν την κατάψυξη, η τελική συγκέντρωση της γλυκερίνης, καθώς και ο αριθμός των σπερματοζωαρίων ήταν 5% και 562-924x106/ml, αντιστοίχως. Τα κατεψυγμένα σφαιρίδια αραιωμένου σπέρματος, με ή χωρίς αντιοξειδωτικά, αποψύχθηκαν σε διάλυμα Tris-κιτρικό οξυ-γλυκόζη(40°C για 30 sec), το οποίο περιείχε 0, 0.49, 0.97 ή 1.94mg καφείνης/ml και επωάσθηκαν (ΐ40-230χ106 σπερματοζωάρια/ml) σε θερμοκρασία 30°C για 3 h. Η κινητικότητα των προοδευτικά κινουμένων σπερματοζωαρίων (%) εκτιμήθηκε μετά τη φυγοκέντρηση, πριν την κατάψυξη και 0, 1, 2 και 3 h μετά την απόψυξη. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι υπήρχε σημαντική επίδραση (Ρ<0.05)των χειρισμών στην κινητικότητα των σπερματοζωαρίων μόνο μετά την απόψυξη. Η προσθήκη μόνο αντιοξειδωτικών ή μόνο καφείνης δεν βελτίωσε σημαντικά τη διατήρηση της κινητικότητας του σπέρματος. Αντίθετα, η προσθήκη των αντιοξειδωτικών, σε συνδυασμό με 0.97 ή 1.94 mg καφείνης/ml, αποτέλεσαν τον καλύτερο συνδυασμό για τη σημαντική βελτίωση της μακροβιότητας των σπερματοζωαρίων του επιβήτορα.

Λεπτομέρειες άρθρου
  • Ενότητα
  • Research Articles
Λήψεις
Τα δεδομένα λήψης δεν είναι ακόμη διαθέσιμα.
Αναφορές
Aitken RJ, Baker MA (2004) Oxidative stress and male reproductive biology. Reprod Fertil Dev, 16:581-588.
Alvarez, JG, Storey BT (1983) Taurine, hypotaurine, epinephrine and albumin inhibit lipid peroxidation in rabbit spermatozoa and protect against loss of motility. Biol Reprod, 29:548-555.
Andrews JC, Nolan JP, Hammerstedt RH, Bavister BD (1994) Role of zinc during hamster sperm capacitation. Biol Reprod, 51:1238-1247.
Ball BA, Vo A (1999) Reactive oxygen species generation by equine spermatozoa. Biol Reprod, 60, (Suppl 1): 136-137.
Ball BA, Gravance CG, Medina V, Baumber J, Liu IKM (2000) Catalase activity in equine semen. Am J Vet Res, 61:1026-1030.
Ball BA, Medina V, Gravance CG, Baumber J (2001) Effect of antioxidants on preservation of motility, viability and acrosomal integrity of equine spermatozoa during storage at 5 degrees C. Theriogenology, 56:577-589.
Baumber J, Vo A, Sabeur K, Ball BA, (2002) Generation of reactive oxygen species by equine neutrophils and their effect on motility of equine spermatozoa. Theriogenology, 57:1025-1033.
Bilodeau JF, Chatterjee S, Sirard MA, Gagnon C (2000) Levels of antioxidant defenses are decreased in bovine spermatozoa after a cycle of freezing and thawing. Mol Reprod Dev, 55:282-288.
Bilodeau JF, Blanchette S, Gagnon C, Sirard MA (2001) Thiols prevent H202-mediated loss of sperm motility in cryopreserved bull semen. Theriogenology, 56:275-286.
Bilodeau JF, Blanchette S, Cormier N, Sirard MA (2002) Reactive oxygen species-mediated loss of bovine sperm motility in egg yolk Tris extender: protection by pyruvate, metal chelators and bovine liver or oviductal fluid catalase. Theriogenology, 57:1105-1122.
Bruemmert JE, Coy RC, Squires EL, Graham JF (2002) Effect of pyruvate on the function of stallion spermatozoa stored for up to 48 hours. J Anim Sci, 80: 12-18.
El-Sheltawi MAF, Abdel-Malak MG, Abdel-Malak G, Khalifa TAA (1999) Impact of zinc and tocopherol on functional competence of cryopreserved buffalo spermatozoa. Assiut Vet Med J, 42:291-309.
Engle CE, Foley CW, Witherspoon DM, Scarth RD, Goetsch DD (1975) Influence of mare uterine tubal fluids on the metabolism of stallion sperm. Am J Vet Res, 36:1149-1152.
Halliwell Β (1988) Albumin, an important extracellular antioxidant? Biochem Pharmacol, 37:569-571.
Hegab AO, Khalifa TAA (2003) Highlights on biological role of superoxide dismutase activity in buffalo and stallion seminal plasma. Kafr El-Sheikh Vet Med J, 1:867-880.
Hughes CM, Lewis SEM, McKelvey-Martin VJ, Thompson W (1998) The effects of antioxidant supplementation during Percoli preparation on human sperm DNA integrity. Hum Reprod, 13:1240-1247.
Khalifa TAA (2001) Effect of some antioxidants on viability on preserved buffalo and ram semen. Ph.D. Thesis, Faculty of Veterinary Medicine, Cairo University, Egypt.
Khalifa TAA, Zaabel SM, El-Boushy ME (2003) Significance of non-sperm cells in equine semen. Zag Vet J, 31:70-77.
Mammoto A, Masumoto N, Tahara M, Ikebuchi Y, Ohmichi M, Tasaka K, Miyake A (1996) Reactive oxygen species block sperm-egg fusion via oxidation of sperm sulfhydryl proteins in mice. Biol Reprod, 55:1063-1068.
Mann T, Lutwak-Mann C (1981) Male reproductive function and semen. Springer-Verlag Berlin Heidelberg Publishers, New York.
Megahed GA, Anwar MM (1997) Effect of calcium channel blocker on quality of Egyptian buffalo liquid semen. Assuit Vet Med J, 38:142-152.
Milovanov VK, Trubkin GD, Chubenko NS, Tsvetkov IV, Erzin ZK, Meschankin AB (1964) Artificial insemination of livestock in the USSR. Israel program for scientific translations, Jerusalem, pp. 102-104.
Parks JE, Lynch DV (1992) Lipid composition and thermotropic phase behavior of boar, bull, stallion and rooster sperm membranes. Cryobiology, 29: 255-266.
Pommer AC, Linfor JJ, Meyers SA (2002) Capacitation and acrosomal exocytosis are enhanced by incubation of stallion spermatozoa in a commercial semen extender. Theriogenology, 57:1493-1501.
Roldan ERS (1998). Role of phospholipases during sperm acrosomal exocytosis. Front Biosci, 3:dl 109-1119.
Samper, J.C., 2001. Management and fertility of mares bred with frozen semen. Anim. Reprod. Sci. 68, 219-228.
Samper JC, Crabo BG (1993) Assay of capacitated, freeze-damaged and extended stallion spermatozoa by filtration. Theriogenology, 39:1209-1220.
Shannon P, (1965) Contribution of seminal plasma, sperm numbers and gas phase to dilution effects of bovine spermatozoa. J Dairy Sci, 48:1357-1361.
Snedecor GW, Cochran WG, (1980) Statistical methods. 7th edition, J.B.H. Publishing Co., Oxford.
Upreti GC, Jensen K, Munday R, Duganzich DM, Vishwanath R, Smith JF, (1998) Studies on aromatic amino acid oxidase activity in ram spermatozoa: role of pyruvate as an antioxidant. Anim Reprod Sci, 51:275-287.
Vishwanath R, Shannon Ρ (1997) Do sperm cells age? A review of the physiological changes in sperm during storage at ambient temperature. Reprod Fertil Dev, 9:321-331.
Zheng RL, Zhang Η (1997) Effects of ferulic acid on fertile and asthenozoospermic infertile human sperm motility, viability, lipid peroxidation and cyclic nucleotides. Free Radie Biol Med 22:581-586.
Τα περισσότερο διαβασμένα άρθρα του ίδιου συγγραφέα(s)