Παραγωγή διαγονιδιακών προβάτων: Μικροέγχυση της γονιδιακής κατασκευής Ρ77 (pas1-καζεΐνη- χυμοζίνη) των βοοειδών σε ζυγωτά-έμβρυα προβάτων φυλής Χίου
Δημοσιευμένα:
Jan 31, 2018
Λέξεις-κλειδιά:
πρόβατο μεταφορά γονιδίων Ρ77 as1-καζεΐνη χυμοζίνη
Περίληψη
Στην εργασία αυτή μελετήθηκε η δυνατότητα ενσωμάτωσης της γονιδιακής κατασκευής Ρ77 των βοοειδών σε ζυγωτά και έμβρυα δυο κυττάρων προβάτων φυλής Χίου. Η γονιδιακή κατασκευή Ρ77 των βοοειδών περιλαμβάνει 2,9 kb από τον προαγωγέα του γονιδίου της α8 1 - καζεΐνης που συγχωνεύθηκαν με το γονίδιο της χυμοζίνης ανάμεσα στο 2 και 9 εξονιο. Η έγχυση της γονιδιακής κατασκευής έγινε με μικροχειριστήριο υπό παρατήρηση σε ανάστροφο μικροσκόπιο σε έναν από τους δυο προπυρήνες του ζυγωτοΰ ή στον πυρήνα του ενός βλαστομεριδίου του εμβρύου. Σε κάθε πυρήνα έγινε μικροέγχυση διαλύματος 1 pi, το οποίο περιείχε περίπου 1000 αντίγραφα της αλληλουχίας DNA. Χρησιμοποιήθηκαν συνολικά 193 ζυγωτά και 87 έμβρυα δυο κυττάρων, τα οποία συλλέχθηκαν από 49 προβατίνες δότες φυλής Χίου. Τα 175 ζυγωτά και τα 76 έμβρυα δυο κυττάρων, στα οποία η μικροέγχυση διενεργήθηκε με επιτυχία, μεταφέρθηκαν με λαπαροσκοπικές τεχνικές στους ωαγωγοΰς 68 προβατίνων δεκτών μετά από in vitro καλλιέργεια 1-5 ωρών. Οι 22 (32,4%) από τις προβατίνες δέκτες γέννησαν 29 αρνιά που αντιστοιχούν στο 11,6% του συνόλου των ζυγωτών - εμβρύων που μεταφέρθηκαν. Η ανάλυση της γενετικής σύστασης των αρνιών που γεννήθηκαν έγινε με τεχνικές PCR σε δείγματα δέρματος. Σε ένα θηλυκό αρνί διαπιστώθηκε ενσωμάτωση της γονιδιακής κατασκευής Ρ77 των βοοειδών στο γονιδίωμά του. Η ανάπτυξη και ενήβωση του διαγονιδιακοΰ αρνιού είναι φυσιολογική, βρίσκεται δε σε κατάσταση εγκυμοσύνης, η οποία εξελίσσεται φυσιολογικά. Είναι το πρώτο διαγονιδιακό παραγωγικό ζώο που γεννήθηκε στην Ελλάδα.
Λεπτομέρειες άρθρου
- Πώς να δημιουργήσετε Αναφορές
-
VAINAS (Ε. ΒΑΪΝΑΣ) E., BESENFELDER, U., CHRISTODOULOU (B. ΧΡΙΣΤΟΔΟΥΛΟΥ) V., KUEHHOLZER, B., AMIRIDIS (Γ.Σ. ΑΜΟΙΡΙΔΗΣ) G. C., BELIBASAKI (Σ. ΜΠΕΛΙΜΠΑΣΑΚΗ) S., & BREM, G. (2018). Παραγωγή διαγονιδιακών προβάτων: Μικροέγχυση της γονιδιακής κατασκευής Ρ77 (pas1-καζεΐνη- χυμοζίνη) των βοοειδών σε ζυγωτά-έμβρυα προβάτων φυλής Χίου. Περιοδικό της Ελληνικής Κτηνιατρικής Εταιρείας, 50(2), 138–143. https://doi.org/10.12681/jhvms.15707
- Τεύχος
- Τόμ. 50 Αρ. 2 (1999)
- Ενότητα
- Research Articles
Αυτή η εργασία είναι αδειοδοτημένη υπό το CC Αναφορά Δημιουργού – Μη Εμπορική Χρήση 4.0.
Οι συγγραφείς των άρθρων που δημοσιεύονται στο περιοδικό διατηρούν τα δικαιώματα πνευματικής ιδιοκτησίας επί των άρθρων τους, δίνοντας στο περιοδικό το δικαίωμα της πρώτης δημοσίευσης.
Άρθρα που δημοσιεύονται στο περιοδικό διατίθενται με άδεια Creative Commons 4.0 Non Commercial και σύμφωνα με την άδεια μπορούν να χρησιμοποιούνται ελεύθερα, με αναφορά στο/στη συγγραφέα και στην πρώτη δημοσίευση για μη κερδοσκοπικούς σκοπούς.
Οι συγγραφείς μπορούν να καταθέσουν το άρθρο σε ιδρυματικό ή άλλο αποθετήριο ή/και να το δημοσιεύσουν σε άλλη έκδοση, με υποχρεωτική την αναφορά πρώτης δημοσίευσης στο J Hellenic Vet Med Soc
Οι συγγραφείς ενθαρρύνονται να καταθέσουν σε αποθετήριο ή να δημοσιεύσουν την εργασία τους στο διαδίκτυο πριν ή κατά τη διαδικασία υποβολής και αξιολόγησής της.
Λήψεις
Τα δεδομένα λήψης δεν είναι ακόμη διαθέσιμα.
Αναφορές
Rucker ΕΒ, Piedrahita JA. Cre-mediated recompination at the murine whey acidic protein (mWAP) locus. Theriogenology 1997,47: 228
Lee CS, Choi YH, Oh KB, Kang YK, Lee KK. Temporal – and spatial specific expression of bovine b-casein/bovine growth hormone fusion gene in transgenic mice. Theriogenology 1997,47:225
Gavin WG, Pollock D, Fell P, Yelton D, Cammuso C, Harrington M, Lewis-Williams J, Midura P, Oliver A, Smith TE, Wilburn B, Echelard Y, Meade H. Expression of the antibody hBR96-2 in the milk of transgenic mice and production of hBR96-2 transgenic goats. Theriogenology 1997,47:214.
Hammer RE, Pursel VG, Rexroad CE, Wall RJ, Bolt DJ, Ebert KM, Palmiter RD, Brinster RL. Production of transgenic Rabbits, Sheep and Pigs by microinjections. Nature 1985,315:680-683.
Rexroad CE, Hammer RE, Behringer RR, Palmiter RD, Brinster RL. Insertion expression and physiology of growth vepulating genes in ruminants J Reprod Fert 1990, (supp.) 41:119-124
Rexroad CE, Mayo K, Bolt DJ, Elsasser ΤΗ, Miller KF, Berrtinger RR, Palmiter RD, Brinster RL. Transferrin and albumin directed expression of growth - related peptides in transgenic sheep. J anim Sci 1991, 69 (7) : 2995-3004.
Murray JD, Nancarow CD, Marshall JT, Hazelton IG, Ward KA. Production of transgenic merino sheep by microinjection of ovine metallotheionine - ovine growth hormone fusion genes. Reprod Fertil Develop 1989,1:147-155.
Ward KA, Nancarrow CD. The genetic engineering of production traits in domestic animals. Experimentia 1991,47: 913-922.
Powell BC, Walker SK, Bawden CS, Sivaprasad AV, Rogers GE. Transgenic sheep and wool growth : possibilities and current status. Reprod Fertil Develop 1994, 6(5) : 615-623.
Damak S, Jay NP, Barell GK, Bullock DW. Targeting gene expression to the wool follicle in transgenic sheep. Biotechnology, 1996,14 (2): 181-184.
Damak S, Su-Hung Y, Jay NP, Bullock DW, Su HY. Improved wool production in transgenic sheep expressing insulin like growth factor 1. Biotechnology, 1996,14(2):185-188.
Lo D, Pursel V, Linton PJ, Sandgren E, Behringer R, Rexroad C, Palmiter RD, Brinster RL. Expression of mouse IgA by transgenic mice pigs and sheep. Eur J Immunol 1991, 21:1001-1006.
Clements JE, Wall RJ, Narayan O, Hauer D, Sheffer D, Powell AM, Zink MC, Rexroad CE. Transgenic sheep that express the visna virus envelope gene. Theriogenology 1994, 41:180.
Simons JP, Wilmut I, Clark AJ, Archibald AL, Bishop JO, Lathe R. Gene transfer into sheep. Biotechnology 1988, 6: 179-183.
Carver A, Wright G, Cottom D, Cooper J, Dalrymple M, Temperley S. Udell M, Reeves D, Percy J, Scott A, Barrass D, Gibson Y, Jeffrey Y, Samuel C, Colman A, Garner I. Expression of human alpha 1 antitrypsin in transgenic sheep. Cytotechnology 1992 9: 77-84.
McClenaghan M, Archibald AL, Harris S, Simons JP, Writelaw CBA, Wilmut I, Clark AJ. Production of human alpha 1 - antitrypsin in the milk of transgenic sheep and mice: targeting expression of cDNA sequences to the mammary gland. Animal Biotechnology 1991,2:161-176.
Clark AJ, Bessos H, Bishop JO, Brown P, Harris S, Lathe R, McClenaghan M, Prowse C, Simons JP, Whitelaw CBA, Wilmut I. Expression of human anti-hemophilic factor IX in the milk of transgenic sheep. Biotechnology 1989,7:487-492.
Schnieke AE, Kind AJ, Ritchie WA, Mycock K, Scott AR, Ritchie M, Wilmut I, Colman A, Campbell KHS. Human factor IX transgenic sheep produced by transfer of nuclei from ttansfected fetal fibroblasts. Science, Washington, 1997, 278 (5346) : 2130-2133.
Halter R, Carnwath J, Espanion G, Herrmann D, Lemme E, Niemann Η, Paul D. Strategies to express factor VIII gene constructs in the ovine mammary gland. Theriogenology 1993,39:137-149.
Brem G, Hartl P. High-level expression of prochymosin in the milk of transgenic rabbits. In Frontiers of Biotechnology in Agriculture, Conference 1-4 August, 1991, Sea of Galilee, Israel
Brem G, Besenfelder U, Zinovieva N, Seregi J, Solti L, Hartl P. Mammary gland specific expression of chymosin constructs in transgenic Rabbits. Theriogenology 1995,43(1 ) :175.
Ernst LK, Gol'dman IL, Zivov'-eva NA, Bashkeev ED, Gogolevskii PA, Kadulin SG, Brem G. Production of transgenic sheep carrying the gene construction alpha SI casein/chymosin Doklady - Biochemistry 1995,345(4):187-189.
Boscos C, Vainas E, Kouskoura Th, Samartzi F, Vafiadis D, Dellis S. Superovulatory response of Chios and Friesian ewes to two FSH-P dose levels. Reprod dorn anim. 1997 (32):195-198.
Kuehholzer B, Endoskopische Embryotransferverfahren bein Schaf. Wien vet. med. U, Diss. 1996.
Hidaka M, Sasaki K, Unzumi Τ, Beppu T. Cloning and structural analysis of the calf prochymosin gene. Gene 1986, 43:197-203
Bonsing J, Mackinlay AG. Recent studies on nucleotide sequences encoding the caseins. J Dairy Res 1987,54:447-461
Ausubel FM, Brent R, Kingston RE, Moore DD, Seidman JG, Smith JA, Struhl K. Current protocols in molecular biology John Willey and Sons, 1987, New York.
Colman A. Production of proteins in the milk of transgenic livestock : problems, solutions and successes. Am J Clin Nutr. 1996, 63 (4), 639-645.
Menck MC, Mercier Y, Lobo RB, Heyman Y, Renard JP, Thompson EM. In vivo luminescent selection of putative transegenic bovine blastocysts. Theriogenology 1997,47:227.
